生物制品中的病毒*/灭活验证检测-飞凡检测项目

飞凡检测可进行病毒*/灭活验证检测，出具国家认可的*检测报告。详情咨询：13764818040。
一、研究背景
1. 质量即生命
由于生物制品通常是直接注射给药，产品若遭受病毒污染，对患者可能造成重大伤害。在人类历史上，疫苗和血液制品等都曾出现过病毒污染的案例。
表1   历史上生物制品病毒污染案例
现代生物制品经常使用动物细胞来作为蛋白表达生产系统，以保证产物的正确构象和活性，比较常见的一种就是中国仓鼠卵巢细胞系（CHO细胞）。作为啮齿类动物细胞，CHO细胞常表达内源性逆转录病毒样颗粒，在细胞上清中通常可检测到 10 3 ～10 9 /mL 逆转录病毒样颗粒。这些颗粒形态、生化性质、序列等与传染性逆转录病毒相似。
CHO细胞培养过程中有可能发生外源性病毒污染，各国药监机构要求临床试验前和生产阶段前的申报材料中，纯化工艺必须经过病毒*/灭活验证，以确保无论是临床试验患者注射用，还是推向市场的产品，均不会出现病毒污染，酿成重大医疗事故。
因此，单克隆抗体和重组蛋白类等生物制品，以靶向性强、*小和疗效显著的特点，已经成为生物医药产业中非常重要的一类产品，并****药品市场，也是今后生物医药行业发展的重要动力所在。
2. 国内外病毒*验证法律法规
美国、欧盟法规建立相对较早，体系相对健全；国内法规发布较晚，主要在参照美国、欧盟法规的基础上，结合自身实际，做了一定的完善。
随着国外申报或中外双报的生物制品企业越来越多，本文整理了关于国内外病毒*验证法律法规及遵循的指导原则，见表2。
表2  国内外病毒*验证法律法规

二、病毒*验证常用指示病毒
病毒*/灭活验证中，较好的情况是把每种可能出现的污染病毒都做一次验证，研究数据越多、覆盖面越广、报告说服力越强，但考虑时间、人力和资金的成本，每种病毒都做一遍，不太现实。
结合已有的科学研究，美国、欧盟等药监机构官员及病毒学领域的科学家提出了指示病毒的概念，即建议在病毒*验证过程中采用的病毒包含以下四种特性即可：“单链和双链的RNA及DNA、脂包膜和非脂包膜、强和弱抵抗力、大和小颗粒等”。
具体来看，在IND阶段，主要以逆转录病毒、细小病毒和疱疹病毒的*能力作为抗体或者融合蛋白的病毒*验证指标。在NDA和BLA阶段，主要使用3～5种指示病毒，呼肠孤病毒、小核糖核酸病毒、多瘤病毒等其他种类病毒的比例会有所增加。
表3  四种常用指示病毒性质

三、国内外病毒*验证申报差异
1. 指示病毒的差异
国内指导原则要求比较详细具体，明确指出了病毒类型；国外规则没有写明病毒具体要求，仅要求尽可能选择污染产品较相似的病毒进行验证，即特异性指示病毒；同时需要关注理化性质较宽的非特异性病毒。
2. 工艺选择上 的差异
国内IND申报时，一般选择低pH和膜过滤这两个工艺进行验证；国外申报时，除了选择低pH和膜过滤，还需进行层析工艺验证。
3. 在工艺重复性方面的差异
国内指导原则虽然没有硬性规定，但通常需要做三个批次；在国外的指导原则中，明确指出至少分别做两次独立的研究来证实*的可重复性，因此一般是一批样品重复2次。
表4  国内外病毒*验证工艺流程对比

四、我国病毒*/灭活验证技术服务机构
目前，进行病毒*验证研究有三种方式：企业自验证、第三方验证、中检院验证（中国食品药品检定研究院）。限于建设生物*二级实验室的高昂成本，以及在构建符合国内外申报标准的病毒*/灭活验证体系方面的困难，比如获得相应的指示病毒株，为控制成本考虑，大多数生物制药企业主要提交中检院或者第三方机构开展病毒*灭活验证。
近年来，单克隆抗体和重组蛋白类等生物制品研发热火朝天，在众多生物制药企业的迫切需求之下，第三方技术服务机构逐渐增多，并逐步接轨国际标准。目前，国内第三方检测机构有苏州飞凡等。